Молекулярная диагностика меланомы

Правильно и своевременно поставленный диагноз — важная составляющая успешного лечения опухолевых заболеваний. Знание молекулярных механизмов, участвующих в развитии и прогрессировании меланомы, имеет решающее значение для классификации и лечения болезни.

Молекулярно-генетическое тестирование — это универсальный метод, основанный на анализе ДНК, позволяющий точно и быстро выявлять мутации в генах, которые вызывают злокачественное перерождение. Мутации, или генетические изменения, нарушают нормальную работу клеток, что приводит к их неконтролируемому делению и распространению по организму. Из-за этого появляется и растет опухоль. Выявление таких мутаций с помощью молекулярной диагностики позволяет установить верный диагноз и подобрать правильное лечение, что значительно улучшает прогноз заболевания¹.

Меланома — это злокачественная опухоль, возникающая из меланоцитов — клеток, содержащих темный пигмент меланин. В 90% случаев развивается меланома кожи². Достижения молекулярной медицины последних десятилетий пролили свет на механизмы возникновения и развития меланомы, открыли новые потенциальные мишени для лечения. Современные препараты не просто убивают делящиеся клетки, а воздействуют на четко определенные внутриклеточные процессы с конкретными мутациями³.

Было обнаружено, что изменения в генах BRAF и NRAS, которые кодируют белки, участвующие в передаче сигнала митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK), играют важную роль в развитии меланомы⁴.

Ген BRAF кодирует фермент серин-треониновую киназу, которая выполняет одну из ключевых функций в процессе передачи сигнала в клетках. При мутации в гене активируется фермент, нарушающий работу сигнального пути, в результате чего начинается активное неконтролируемое деление и рост клеток, их естественная программируемая гибель не происходит. Все это способствует опухолевому росту и метастазированию. Мутации в гене BRAF обнаруживают в 40–60% случаев меланомы кожи, причем наиболее распространенной является замена аминокислоты валина на глутаминовую кислоту в 600-м кодоне (BRAFV600E)⁴.

Выделяют несколько вариантов мутаций в гене BRAF (см. таблицу)⁴^, ⁶, при которых одни аминокислоты в участке гена заменяются другими.

Наличие мутаций в гене BRAF нередко бывает сопряжено с более тяжелым клиническим течением: чаще наблюдаются изъязвления, развитие местных рецидивов и поражение регионарных лимфатических узлов⁷.

Открытие молекулярной мишени BRAF и понимание ее роли в патогенезе меланомы легло в основу разработки нового класса препаратов — ингибиторов протеинкиназы BRAF, т.е. средств, подавляющих активность мутированного фермента, кодируемого геном BRAF⁸. До появления такого метода лечения пациенты, страдающие меланомой с мутацией BRAF, имели худший прогноз, чем пациенты без мутации в гене⁹^–¹⁰.

Для того чтобы определиться с тактикой лечения пациента, необходимо выполнить тест на наличие мутации гена BRAF. Во время обследования врач проводит биопсию: берет образец ткани опухоли и направляет в лабораторию для выявления мутации.

В качестве материала для анализа используют ДНК, выделенную из свежезамороженной ткани опухоли или ткани, фиксированной формалином и заключенной в парафин. Молекулярно-генетическое исследование проводят методами, основанными на полимеразной цепной реакции (ПЦР). Принцип ПЦР заключается в многократном копировании определенного участка (фрагмента) ДНК.

Исследование можно выполнить в крупных онкологических больницах и федеральных лабораторных сетях: «Инвитро», «Гемотест», ДНКОМ, «СитиЛаб» и других. Также можно получить информацию по телефону горячей линии проекта «Молекулярная диагностика»: 8 (800) 600-36-70. В среднем срок выполнения составляет от 7 до 14 дней и зависит от лаборатории.

При отсутствии мутации в гене BRAF ищут мутации в других генах: NRAS и с-KIT. Это важно для планирования и подбора индивидуальной лекарственной терапии.

Мутация NRAS

Мутации в гене NRAS встречаются примерно в 20% случаев меланомы. Чаще всего их вызывает повышенная инсоляция (чрезмерное воздействие солнечного света)¹¹. При этом виде мутации может развиваться невосприимчивость к препаратам — ингибиторам BRAF.

Мутация cKIT

При подногтевой меланоме, опухоли на слизистых, кончиках пальцев, ладонях наиболее часто встречаются мутации гена с-KIT. Этот протоонкоген кодирует трансмембранный тирозинкиназный рецептор фактора роста стволовых клеток KIT/SCF-R, оказывая влияние на миграцию и рост меланоцитов. Мутации с-KIT выявляют в основном при меланоме открытых участков кожи, подверженных регулярному солнечному облучению и механическим повреждениям¹².

Современная медицина позволяет пациентам с меланомой кожи подобрать персонифицированную терапию, нацеленную на конкретные молекулярные изменения в злокачественных клетках (таргетная терапия). Для этого необходимо провести исследование возможных мутаций, от результатов которого и будут зависеть дальнейшие подходы к лечению опухоли.

M-RU-00014836 Декабрь 2023